目的：分析环孢素A及伏立康唑血药浓度测定中采用双波长高效液相色谱法的价值。方法：采用双波长高效液相色谱法检测环孢素A、伏立康唑，设置其波长分别为215nm、256nm，流速均为1mL/min，分析血药浓度保留时间、血药浓度范围及检测准确率。结果：环孢素A保留时间为5.34min，血药浓度30～1500ng/mL，检测准确率在98%以上；伏立康唑保留时间为6.51min，血药浓度200～10000ng/mL，检测准确率在98%以上。结论：选择双波长高效液相色谱法同时对环孢素A及伏立康唑血药浓度进行检测，可掌握药物血药浓度保留时间，亦可获得其大致浓度范围，为临床用药提供丰富参考。