【目的】为丰富浓香型白酒大曲中高产酯化酶菌株,提高白酒大曲的品质和白酒优级品率.【方法】首先通过产酯化酶透明圈法初筛和酸碱滴定法复筛确定产酯化酶酶活力最高的细菌菌株,进而结合形态学鉴定、分子生物学分析和生理生化试验鉴定菌株种属,最后研究在液体发酵培养基中的氮源和碳源的选择及其最适量与发酵液初始pH值因素对其产酶能力的影响,找到最适产酶条件.【结果】从张弓老酒大曲中筛选出产细菌200株,其中1株菌株为表皮葡萄球菌的酯化酶活力最高为41.67U/mL.在单因素实验中发现玉米粉、酵母粉和pH对该菌的产酶能力影响较大,在响应面分析中表明模型拟合度适宜并且合理,最优产酶条件为pH为4,玉米粉最适量为2g,酵母粉最适量为0.5g,在此条件下酶活力高达83.33U/mL,比之前高50.24%.【结论】在张弓老酒大曲中存在丰富的产酯化酶菌种资源且找到一株产酯化酶能力最强的菌株,对其产酶条件进行单因素实验结合响应面分析有利于提高产酶能力.