目的建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-QQQ-MS/MS）法比较研究金银花的水提液中核苷类成分的含量。方法采用WatersBEHC18（2.1mm×50mm,1.7μm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相梯度洗脱，流速0.4mL·min-1,柱温30℃,进样量3μL,电喷雾离子源（ESI）,正离子多反应监测模式（MRM）对金银花的水煎液中核苷类成分的含量进行测定。结果金银花中共检测出尿嘧啶、鸟嘌呤、黄嘌呤、β-胸苷、尿苷、2′-脱氧腺苷、2′-脱氧鸟苷、肌苷、鸟苷、胸腺嘧啶、腺苷、环磷酸鸟苷等12种核苷类成分，其中鸟苷和尿苷的含量较高，胸腺嘧啶、腺苷、环磷酸鸟苷的含量由于过低而未展示，其余9种核苷类成分在测定质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.9990）,方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.0%,平均加样回收率在99.4%～102.1%,RSD在1.7%～2.7%。结论该方法准确、可靠，适用于同时测定金银花饮片中核苷类成分的含量，可用于金银花饮片的质量控制。